本發明屬于紡織技術領域，公開了一種ε‑多聚賴氨酸接枝立構抗菌無紡布的制備方法，包括：將ε‑多聚L‑賴氨酸和ε‑多聚D‑賴氨酸分別放在含有9‑芴甲基‑N‑琥珀酰亞胺基碳酸酯的DMF/NaHCO溶液中反應，對氨基進行保護，再在N,N‑二甲基甲酰胺和二氯亞砜的混合溶液中反應，反應結束后減壓蒸餾去除未反應的二氯亞砜，得到ε‑多聚L‑賴氨酸酰氯溶液與ε‑多聚D‑賴氨酸酰氯溶液，將兩種溶液混合后加入三乙胺，得接枝液；將等離子體處理后的棉質無紡布二浸二軋接枝液，經20％哌啶溶液洗滌后，再水洗晾干。本發明制備方法制備得到的ε‑多聚賴氨酸接枝立構抗菌無紡布抗菌作用強、耐洗性能好。